Wir haben die Gurke einfach mitsamt ihrer Schale kleingerieben. So kann der Lysispuffer, den wir in Schritt zwei herstellen, an einer größeren Oberfläche angreifen. Außerdem sind die Zellen der Gurke auf diese Weise schon teilweise geöffnet. Die geriebene Gurke ist somit ein erster mechanischer Aufschluss, der noch weiter bearbeitet werden kann.

Wer seine eigene DNA isolieren möchte, schabt einfach mit einem Löffel auf der Innenseite der Backe entlang und entnimmt so Zellen. Die Speichel-Zellen-Mischung wird dann zunächst in warmes Wasser überführt. Und nicht zu sparsam sein. Mehr Zellen bedeuten mehr DNA, die später zu sehen ist!

Dazu mischt du einfach viel Spülmittel mit viel Salz in einem der Marmeladengläser. Das Salz sollte sich lösen. Wahrscheinlich musst du etwas Wasser hinzufügen, damit das klappt.

Das enthaltene Spülmittel löst die Lipiddoppelschicht der Zellmembran auf. Eigentlich ganz logisch, denn Spülmittel soll ja auch beim Abwasch das Fett = Lipide von Pfannen etc lösen.

Das Salz stabilisiert die DNA, die nun frei im Lysat herumschwimmt.

Die Mengenverhätlnisse beim Lysispuffer sind deswegen nicht so wichtig, weil kein sensibles Gleichgewicht hergestellt sein muss. Sondern lediglich genug Spülmittel und Salz vorhanden sein muss, damit die Zellwand aufgelöst und die DNA stabilisiert wird.

Für ganz Interessierte: Im Labor werden auch gerne Enzyme verwendet, die die Zellwand zerstören, wie etwas die das Lysozym oder ein Gemisch aus Lyticase und Zymolase. Diese verdauen nämlich auch die Zellwände von Pilzen bzw Bakterien, die diese zusätzlich besitzen. Spülmittel alleine würde hier nicht genügen.

Als ersten Schritt, überführst du nun dein Zellmaterial in den Lysispuffer. Dazu füllt su so viel von der geriebenen Gurke (in unserem Fall) in das Marmeladenglas voller Lysispuffer.

Für diejenigen, die die eigene DNA isolieren möchten, ist es einfacher den Lysispuffer in das Gefäß mit warmem Wasser zu überführen.

Dann wird deine Mischung ca 15 Minuten lang in ein heißes Wasserbad gestellt. Hier lösen sich nun die Membranen auf.

Achtung! Das Wasser darf nicht wärmer als 60°C sein, sonst zerstörst du alle Proteine und die DNA und später ist nichts zu sehen. Lieber mit einem Thermometer überprüfen!

Anschließend kühlst du das Gemisch für weitere 10 Minuten im Eisbad. So wird die laufende Reaktion abrupt gestoppt. Außerdem wird so das Gemisch kalt, sodass es den in Schritt 4 benötigten Brennspiritus nicht zu stark erwärmen kann. Es ist sehr wichtig das der Spiritus kalt bleibt (auf jeden Fall unter 0°C).

Als letztes muss das Lysat nun gefiltert werden. Dazu ist das zweite Mareladenglas, der Kaffeefilter und der Trichter da. Die DNA liegt mittlerweise frei in der Flüssigkeit vor. Für den letzten Schritt würde das übrige Zellmaterial nur stören. Es kann einfach im Müll entsorgt werden. Du hast mit keinen bedenklichen Materialien gearbeitet.

Du musst dein Lysat nun vorsichtig mit dem Brennspiritus überschichten. Dazu gießt du ihn langsam und vorsichtig an der Seite deines Marmeladenglases ein. Es bilden sich zwei Phasen.

Achtung! Der Brennspiritus muss wirklich kalt sein (-20°C). Denn nur kalter Spiritus kann die DNA fällen; wenn er zu warm ist, würde die DNA sich darin lösen. Keine Sorge, so hochprozentiger Alkohol gefriert erst ab über -100°C, also kannst du ihn problemlos in den Gefrierschrank stellen, ohne dass die Flasche springt oder verbeult.

Und jetzt heißt es… warten!

Wer sich unsicher ist, ob der Spiritus auch kalt genug war, kann das Marmeladenglas einfach wieder in das Eisbad stellen.

Wer genau hinsieht, kann bereits einen weißen Schleier im oberen Drittel der oberen Phase erkennen.

Hier sind die weißen Flocken schon gut zu sehen. Es handelt sich dabei tatsächlich um DNA!

Nach einer halben Stunde im Eisbad, sah das Experiment bei uns dann so aus.